服务简介 背景：亲和力成熟是单克隆抗体提升药效、降低免疫原性、提高成药性的常见改造策略之一。dafabe888手机版登录可提供亲和力改造、阻断活性改造、种属交叉活性改造以及成药性改造等系列亲和力成熟服务。 方法：根据体内亲和力成熟原理，采取多种突变策略，基于噬菌体展示技术进行大容量突变库构建以获得亲和力显著提升的抗体。 优势：仅需5-6周，获得亲和力提升数倍至近百倍的抗体分子。 案例：平台始建于2017年，截止2022年3月，平台已累计完成180+抗体分子改造，抗体亲和力最多可获百倍提升。 服务内容 服务名称 服务内容 客户提供 交付物及标准 周期 亲和力提升 改造服务 1. 抗原质检 2. 亲本抗体验证 3. 多组合突变库构建 4. 定制化淘选及筛选 5. 大量抗体真核表达 6. 标准化抗体质检 7. 项目针对性验证 1. 抗体序列 2. 对照抗体 3. 抗原蛋白 2-5个抗体，亲和力 比亲本提高 ≥5倍 6 周 成药性 改造服务 1. 抗体序列 2. 对照抗体 3. 抗原蛋白 2-5个优化抗体 5-6 周 阻断提升 改造服务 1. 抗体序列 2. 对照抗体 3. 抗原蛋白 4. 受/配体蛋白 2-5个抗体，阻断活性 比亲本提高 ≥5倍 6 周 种属交叉 改造服务 1. 抗体序列 2. 对照抗体 3. 人抗原蛋白 4. 鼠/猴抗原蛋白 2-5个抗体，交叉活性 比母本提高 ≥5倍 6 周 服务亮点 1. 亲和活性极致提升 采用抗体高级结构模拟及多种突变策略，改造后的抗体亲和力可获数倍至百倍提升。 2. 真核表达全面验证 采用哺乳动物细胞表达系统（CHO/HEK293），表达获得的重组蛋白接近天然构象，具有良好的生物学活性。辅以多维质控，抗体质量全面验证。 3. 靶点类型不受限制 可进行不限靶点种类的亲和力成熟，对于个性化或高难度的改造需求可定制开发，代表性靶点：LAG3、IL-23、CD47、Claudin18.2等。 4. 项目研发经验丰富 dafabe888手机版登录已完成180+抗体分子的改造工作，核心研发人员拥有十年以上从业经验，可根据项目需求进行亲和力的多样化改造。 5. 6周快速优质交付 单轮亲和力成熟仅需6 周，辅以严格质量标准体系，确保高效优质交付。 案例展示 1. 全长抗体Elisa水平验证 1.1. 亲和力与阻断双向提升 项目A背景：抗体（Parental Ab）的亲和力和阻断效果显著弱于对照抗体（Benchmark），需要提升至接近或优于对照抗体（Benchmark）的水平 。dafabe888手机版登录通过单点组合突变建库对抗体（Parental Ab）进行亲和力成熟改造，进行3轮固相和液相海选，获得改造后抗体（Engineered Ab）。 如Fig. 1 所示，改造后抗体（Engineered Ab）的结合活性与阻断活性均与对照抗体（Benchmark）相当，比抗体（Parental Ab） 有了明显的提升。 Fig. 1A 亲和力排序 Fig. 1B 阻断排序 1.2. 物种交叉活性改善 项目B背景：抗体（Parental Ab）与人源抗原有较好的亲和力，但是几乎不结合鼠源抗原，人鼠交叉活性弱。dafabe888手机版登录通过单点和双点组合建库，采用确保人源抗原亲和活性不变，针对鼠源抗原进行3轮次的淘选，以获得良好人鼠交叉活性的抗体。 改造后抗体（Engineered Ab）的人鼠交叉活性检测结果如Fig. 2 所示，在保持人源抗原亲和活性的同时，鼠源抗原EC50值从695.921 nM提升至5.823 nM, 提升了近120倍，人鼠交叉活性改造成功。 Fig. 2A 人源抗原亲和活性检测 Fig. 2B 鼠源抗原亲和活性检测 2. 全长抗体动力学检测 2.1. Fortebio检测 项目C背景：抗体（Parental Ab）的解离速率（kd）较快，体内药代结果不理想。dafabe888手机版登录通过多点组合突变建库，进行4轮针对off-rate海选，对改造后的抗体进行Fortebio亲和动力学检测，以获得低解离速率的抗体分子。 改造后抗体（Engineered Ab）的亲和动力学检测结果如Fig. 3 所示，抗体（Parental Ab）改造后抗体（Engineered Ab） KD值由6.53X10-8 M提升至2.37x10-10 M，提高了276倍。 Fig. 3A Parental Ab Fig. 3B Engineered Ab Samples ID KD (M) ka (1/Ms) kd (1/s) R2 Rmax (nm) Ratio (WT/Ab) Parental Ab 6.53E-08 3.94E+04 2.57E-03 0.99 1.28 1 Engineered Ab 2.37E-10 3.70E+04 8.77E-06 0.99 1.22 276 2.2. Biacore检测 项目D背景：抗体（Parental Ab）已完成功能筛选，各方面数据都与对照抗体（Benchmark）活性相当，需进一步提升抗体KD值至对照抗体（Benchmark）的10倍。dafabe888手机版登录通过单点组合和双点连续突变建库，经3轮淘选，对改造后的抗体进行Biacore亲和动力学检测，最终确定改造后抗体（Engineered Ab）。 如Fig. 4A 所示，抗体（Parental Ab）与对照抗体（Benchmark）活性相当，改造后抗体（Engineered Ab）的KD值由1.98x10-9 M提升至1.01X10-10 M，提高了近20倍。 Fig. 4A Parental Ab Fig. 4B Engineered Ab Fig. 4C Benchmark Samples ID KD (M) ka (1/Ms) kd (1/s) Rmax (RU) Chi² (RU²) Ratio (WT/Ab) Parental Ab 1.98E-09 5.31E+05 1.05E-03 68.97 1.49 1 Engineered Ab 1.01E-10 7.57E+05 7.62E-05 92.83 0.07 20 Benchmark 1.56E-09 2.85E+05 4.46E-04 237.70 2.04 1