服务简介 背景：通过哺乳动物细胞表达制备的治疗性重组蛋白药物，在结构和功能上更接近人体天然抗体。基于此，dafabe888手机版登录推出了蛋白快速制备服务。 方法：dafabet黄金手机版蛋白快速制备服务整合了Gateway载体构建、哺乳动物细胞表达系统、蛋白纯化及理化生化检测技术，并匹配自动化高通量设备进行各类蛋白的快速高质量制备。 优势：速度快，14天内完成构建、表达、纯化，辅以多维质控，交付高品质抗原抗体蛋白。通量高，利用自动化高通量设备，通量能够达到每周2000个小量蛋白制备。 案例：dafabe888手机版登录蛋白制备平台历经6年发展，至今已成功完成数万个蛋白的制备，涵盖纳米抗体、人源或人源化IgG型抗体、细胞因子及其他类型重组蛋白等多种分子类型，积累了丰富的蛋白制备经验。 服务内容 序号 服务名称 服务内容 客户提供 交付物及标准 周期 SAP-5 小量抗体蛋 白快速制备 1. 基因合成（可选） 2. 质粒构建 3. 蛋白表达纯化 4. 质检(SDS-PAGE, SEC, Endotoxin） 含抗体基 因的质粒 交付物.： 1. 0.5-1 mg纯化的抗体蛋白 2. 质检报告 交付标准： 1. 抗体SDS-PAGE纯度＞95%， SEC-HPLC纯度＞90% 2. 内毒素＜1 EU/mg 3. 亲和力测定 （可选）：ELISA/FACS 4. 亲和动力学测定 （可选）：Biacore 2 周 MAP-300 中量抗体蛋 白快速制备 1. 基因合成（可选） 2. 质粒构建 3. 蛋白表达纯化 4. 质检(SDS-PAGE, SEC, Endotoxin） 含抗体基 因的质粒 交付物： 1. 10-30 mg纯化的抗体蛋白 2. 质检报告 交付标准： 1. 抗体SDS-PAGE纯度＞95%， SEC-HPLC纯度＞90% 2. 内毒素＜1 EU/mg 3. 亲和力测定 （可选）：ELISA/FACS 4. 亲和动力学测定 （可选）：Biacore 2-3 周 SPP-30 小量抗原蛋 白快速制备 30 mL 1. 基因合成（可选） 2. 质粒构建 3. 蛋白表达纯化 4. 质检(SDS-PAGE, SEC, Endotoxin） 含目的基 因的质粒 交付物： 1. 0.5-1 mg纯化的抗原蛋白 2. 质检报告 交付标准： 1. 抗原SDS-PAGE纯度＞85%， SEC-HPLC纯度＞90% 2. 内毒素＜1 EU/mg 3. 亲和力测定 （可选）：ELISA / FACS 4. 亲和动力学测定 （可选）：Biacore 2 周 MPP-300 中量抗原蛋 白快速制备 300 mL 1. 基因合成（可选） 2. 质粒构建 3. 蛋白表达纯化 4. 质检(SDS-PAGE, SEC, Endotoxin） 含目的基 因的质粒 交付物： 1. 1-10 mg纯化的抗原蛋白 2. 质检报告 交付标准： 1. 抗原SDS-PAGE纯度＞85%， SEC-HPLC纯度＞90% 2. 内毒素＜1 EU/mg 3. 亲和力测定 （可选）：ELISA / FACS 4. 亲和动力学测定 （可选）：Biacore 2-3 周 服务亮点 1. 真核表达，接近天然 dafabet黄金手机版快速蛋白制备服务采用哺乳动物细胞表达系统（CHO/HEK293），表达获得的重组蛋白具有更接近天然的构象，具有良好的生物学活性。 2. 多维质检，品质保证 可从蛋白的浓度纯度、分子量、稳定性、安全性、电荷异质性、序列变异体和结构分析、结合或阻断生物活性分析等多个维度质控，确保抗原抗体蛋白的品质。 3. 低至2周，高效交付 本服务提供从质粒构建与制备，瞬转表达，蛋白纯化，蛋白质检的一体化服务，最快仅需2周即可交付。 4. 个性定制，灵活选择 3种真核表达体系、数种表达体积、2种瞬转方式、2种纯化标签、8个质控项，客户可根据项目具体需求，从五个维度灵活组合，进行高精准的个性化定制。 服务特性 1. 丰富的哺乳动物细胞表达体系 dafabe888手机版登录拥有Expi-CHO瞬转表达、Expi-293F瞬转表达、293F瞬转表达等多种真核表达系统，能够匹配绝大多数蛋白的表达需求。 Table 1 dafabet黄金手机版真核瞬转表达体系 细胞株 适用的表达类别 Expi--CHO瞬转表达 主要做抗体制备 Expi-293F瞬转表达 主要做抗原制备 293F瞬转表达 主要做抗原制备 2. 先进的生产工艺体系 载体系统整合了国际领先的强启动子、增强子等功能元件，有利于基因的高效整合及表达；建立了质粒构建、蛋白表达、蛋白纯化的高通量自动化平台，具备大规模稳定交付能力。 3. 多维质控分析 3.1. 常用质控分析类别和方法 Table 2 常用质控分析类别和方法 表征内容 检测内容 分析方法 纯度及分子量 分子量及纯度鉴定 SDS-PAGE（必选） 纯度及分子量 纯度精确鉴定 SEC（必选） 稳定性 变性温度测定 DSF 安全性 细菌内毒素检测 LAL 浓度 浓度相对鉴定 A280 （必选） 电荷异质性 电荷异质性测定 CEX 序列变异体 肽谱分析 LC-UV-MS/MS 结构分析 N糖谱分析 LC-MS 生物活性 亲和力测定 ELISA / FACS（可选） 生物活性 亲和动力学测定 SPR / BLI（可选） 3.2. 设备 ・ProteinsimpleMaurice ・Waters ACQUITY UPLC-H-Class PLUS ・BiacoreT200 ・ProbeLifeGator ・Agilent 1260 HPLC ・ABI 7500 Fast RT-PCR 案例展示 1.不同类型蛋白的表达数据 Table 3呈现了四类不同类型蛋白（纳米抗体、人源或人源化IgG型抗体、细胞因子及其他类型重组蛋白）的不同表达体积的表达数据。由Table 3可知，经5-7天的表达，四种类型的蛋白均成功表达纯化，不同类型间的表达量差异较大。 Table 3 dafabet黄金手机版重组蛋白制备案例数据表 案例 蛋白类型 纯化标签 表达系统 表达时间 表达体积 获得蛋白量 检测结果 1 驼源纳米抗体 Fc Expi-CHO 7 天 300 mL 222.3 mg SDS-PAGE纯度>95%, SEC 单体100% 2 人源或人源 化IgG型抗体 Fc Expi-CHO 7 天 15 mL 1.9 mg SDS-PAGE纯度>95%, SEC 单体100% 3 细胞因子 his Expi-CHO 7 天 100 mL 7.7 mg SDS-PAGE纯度>85% 4 某重组蛋白 Fc Expi-293 5 天 50 mL 12.4 mg SDS-PAGE纯度>85% 2.质控数据 蛋白样品的浓度纯度、分子量、热稳定性、结合或阻断生物活性分析、亲和动力学等多个维度质控的案例数据如下图所示： Fig. 2 SDS-PAGE 抗体蛋白纯度>95% Fig. 3 DSF 已上市抗体药A的m值为75℃，该温度与文献报道的Tm值一致 Fig. 4 SEC 蛋白主峰面积>95% Fig. 5 CE SDS 蛋白主峰面积>95% Fig. 6 ELISA binding 抗体亲和活性良好 Fig. 7 FACS binding 抗体细胞水平亲和活性良好 Fig. 8 Biacore 抗体与重组蛋白的亲和力良好